脑低氧预适应及其机制

摘要 预先反复短暂低氧预适应可使脑组织产生低氧适应，可使其在后续的长时间
缺氧中得到保护。脑低氧预适应是脑抗缺血或缺氧的一种内源性保护现象。目前对
脑低氧预适应的机制尚未最后阐明，文章对脑低氧预适应现象及其可能机制的研究
进展进行了综述。?

低氧预适应(hypoxic preconditioning)是指1次或多次短暂、非致死性低氧刺激后
，机体获得的对更严重甚至致死性缺血或缺氧的耐受性。预适应是机体抗缺氧或缺
血的一种内源性保护现象，它不仅存在于多种动物的心脏，而且也存在于肝、肾和
脑等多种组织、器官和细胞中[1，2]。目前关于脑低氧预适应现象及其机制的报道
较少，深入研究脑低氧预适应机制并探讨其临床应用价值，对治疗脑血管病很有意
义。?

1 脑低氧预适应现象?

1986年Schurr等[3]就发现大鼠海马脑片低氧5 min后，其诱发电活动在随后长期低
氧作用后仍能恢复，而对照组则不能。Rising等[4]事先给小鼠经90、120和150 s
 3次低氧(4.5%O2)预处理后，在致死量低氧作用下的存活时间由对照的(108±4) 
s延长到(403±42) s。Vannucci等[5]在37℃下低氧(8%O2)预处理出生6 d的大鼠2
.5 h，24 h后结扎单侧颈总动脉并且低氧(8%O2)处理2.5 h，在出生第30天经神经
病理分析发现，低氧预适应组的14只大鼠中仅6只出现囊状梗死，而未预适应组的
13只大鼠都出现了梗死。?

2 脑低氧预适应的可能机制

2.1 低氧诱导因子-1?

低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1，HIF-1)是一种随着细胞内氧浓度
变化而调节基因表达的转录激活因子，是由氧调节亚单位HIF-1α和结构亚单位HI
F-1β组成的异二聚体，具有DNA结合活性。HIF-1对低氧诱导基因，如促红细胞生
成素、糖酵解酶和血管内皮生长因子等的活化起关键作用。Bergeron等[6]通过对
新生大鼠脑低氧(8%O2)预处理3 h发现，低氧预处理可明显提高HIF-1α和HIF-1β
的表达水平。大鼠腹腔内注射HIF-1诱导剂氯化钴(CoCl2，60 mg/kg)和去铁铵(de
sferrioxamine，DFX，200 mg/kg)后1~3 h， HIF-1α和HIF-1β蛋白水平都升高。
大鼠经CoCl2和DFX预处理24 h后缺血缺氧可分别较对照组发挥75%和56%的脑保护作
用。原代培养大鼠皮质神经元剥夺糖氧30、60、90和120 min后，HIF-1DNA结合活
性增高，而预先剥夺糖氧60 min，48 h后再剥夺糖氧90 min，HIF-1的结合活性反
而降低[7]。以上这些研究表明，HIF-1参与了脑低氧预适应的形成。?
2.2 一氧化氮?

一氧化氮(NO)参与血管舒缩的调节、免疫功能的调制和神经信息的传递，是一种重
要的信使物质。NO是由L-精氨酸经一氧化氮合酶(NOS)催化生成的。NOS同工酶分为
神经元型NOS(nNOS)、诱导型NOS(iNOS)和内皮细胞型NOS(eNOS) 3种，其中nNOS和
eNOS的活性受钙离子调节，合称为结构型NOS(constitutive NOS，cNOS)。Gidday
等[8]低氧(8%O2)预处理新生6 d大鼠3 h发现，这种处理可完全抵抗24 h后的缺血
缺氧性损害。如在新生6 d大鼠脑低氧预处理前0.5 h腹腔注射非选择性NOS抑制剂
左旋硝基精氨酸(2 mg/kg)，给药后0.5~3.5 h即可使cNOS 的活性抑制67%~81%，完
全阻断了低氧预适应的保护作用。但是，如果低氧预处理(本身可降低cNOS 活性5
8%~81%)前腹腔内注射选择性nNOS抑制剂7-硝基吲唑(40 mg/kg)，则不能影响低氧
预适应引起的脑保护作用，这与给予iNOS抑制剂氨基胍(400 mg/kg)的结果相一致
。以上结果表明，NO对低氧耐受的诱导起重要作用。但是，有学者对nNOS和iNOS是
否参与了低氧预适应却提出了质疑，认为只有eNOS产生的NO介导了预适应的保护效
应。?

2.3 腺苷?

腺苷是一种在缺血缺氧时高能磷酸盐分解产生的内源性复合物。腺苷A1受体激动剂
可以缩小梗死体积，减慢缺血早期的能量代谢，并有利于缺氧预适应后突触功能的
恢复[9]，而腺苷受体拮抗剂则可以阻止预适应的形成。Zhang等[10]分别采用酶学
方法和放射性配体结合方法分析了昆明小鼠腺苷含量和腺苷A1受体，发现经4次低
氧预处理组海马腺苷含量明显高于正常对照组和只用1次低氧预处理组，而腺苷A1
受体密度低于正常对照组，与仅用1次低氧预处理组的相同；4次低氧预处理组海马
、脑桥、延髓等脑区腺苷A1受体的亲和力高于正常对照组，表明低氧预处理可以阻
止一些脑区内的腺苷A1受体密度的进一步下降，使腺苷A1受体的亲和力升高。上述
结果提示，低氧预适应可使海马腺苷浓度升高，并通过A1受体发挥神经保护作用。
?

2.4 兴奋性氨基酸?

中枢神经系统内含有大量兴奋性氨基酸(EAA)，几乎所有的神经元都含有谷氨酸受
体，药理学上把谷氨酸受体分为NMDA受体、AMPA受体、红藻氨酸受体、代谢型谷氨
酸受体和L-AP4受体等5型，前3种都是谷氨酸门控的阳离子通道(离子型受体)，后
2种受体合称非NMDA受体。任何引起EAA浓度异常增高的病理变化都会引起兴奋毒性
。EAA与低氧预适应是否有关尚待进一步研究证实。Nakata等[11]用微透析测定方
法表明，低氧预处理并不改变脑内包括EAA在内的任何氨基酸含量，从而认为预处
理导致的低氧耐受与EAA无关。Xie等[12]用小鼠研究外源离子型NMDA受体激动剂天
门冬氨酸和抑制剂氯氨酮对低氧预适应的效应，并用高效液相色谱法测定低氧预处
理时小鼠整个大脑和不同脑区内源性EAA(天门冬氨酸和谷氨酸)浓度的变化，结果
发现，天门冬氨酸和氯氨酮分别显著地缩短和延长了小鼠的标准耐受时间；缺氧1
次后EAA的浓度升高，而4次缺氧后预适应EAA浓度保持不变，甚至下降。这表明离
子型NMDA受体的激活不利于低氧预适应的形成，而抑制其受体则有利于低氧预适应
的形成；EAA的降解或失活对小鼠低氧耐受的形成可能有益。?

2.5 肿瘤坏死因子-α和神经酰胺?

神经鞘磷脂的代谢产物神经酰胺(ceramide)是肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的众
多效应中的第二信使。Liu等[13]对培养大鼠皮质神经元的研究发现，低氧预处理
有保护作用，这种保护作用可被TNF-α预处理所替代，TNF-α中和抗体可削弱此保
护作用。低氧预适应和TNF-α预处理可使细胞内神经酰胺水平升高2~3倍，与耐受
状态一致。烟曲霉毒素B1是一种神经酰胺合酶抑制剂，可减轻神经酰胺的上调。如
在缺氧损伤前将C2-神经酰胺加入培养基中可模拟低氧预适应的效应。上述结果表
明，低氧预适应是通过TNF-α触发而合成神经酰胺所介导的。Chen等[14]在结扎出
生7 d大鼠右侧颈总动脉的同时低氧(8%)预处理2 h，30 min后心室内注射C2-神经
酰胺(150 mg/kg)，5 d后测定梗死体积，发现C2-神经酰胺可使缺血缺氧引起的大
脑损伤(梗死体积)较对照组缩小45%~65%，且Bcl-2和Bcl-xl水平升高，TUNEL阳性
细胞数明显减少，表明神经酰胺对未成熟大鼠大脑有神经保护作用。因此认为，神
经酰胺参与了低氧预适应的形成。?

2.6 自由基及其清除系统?

自由基是具有未配对电子的原子或原子团。脑缺血缺氧时，活性氧产生过多，自由
基生成，细胞膜磷脂受其攻击导致脂质过氧化，细胞膜流动性降低、通透性增高，
线粒体肿胀，溶酶体受损并释放等一系列变化。Duan等[15]比较自由基清除系统的
变化发现，与未预处理组相比，仅低氧处理1次组整个脑区的超氧化物歧化酶(SOD
)和谷胱甘肽过氧化物酶的活性明显降低，而海马脂质过氧化物的浓度明显升高。
但是经低氧处理4次后，它们的水平趋向于恢复至正常对照组水平，提示氧自由基
和它们的特异清除酶参与了低氧耐受形成。Rauca等[16]对成年雄性Wistar大鼠作
低氧预处理(9%O2，91%N2)1 h发现，可阻止戊四氮的致痫作用，而用自由基清除剂
PBN能阻止这种低氧预适应的保护作用。Garnier等[17]事先用低氧(4%O2)处理沙土
鼠后恢复常氧48 h或7 d，发现海马MnSOD有渐进而持续的表达。以上研究表明，自
由基及其内源性清除酶系统参与了低氧预适应的形成和发展。?

2.7 其他机制?

预适应可以降低细胞能量代谢。有实验表明，抑制线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ可以形成预
适应，并可试用于提高机体的缺氧耐受能力[18]。低氧预适应引起的神经保护作用
可以被放线菌酮(一种蛋白合成抑制剂)和放线菌素D(一种RNA合成抑制剂)所抑制，
表明在低氧预适应中有新的基因表达产物形成[19]。热休克蛋白(HSP)是应激反应
蛋白家族中的一员，Wada等[20]用高温(41℃)预处理15 min和低氧(8%)预处理新生
大鼠3 h，24 h后予缺血处理，发现高温和低氧预处理后都不检测到HSP72，只是缺
氧缺血损害本身可诱导背侧纹状体、丘脑(轻度)和海马HSP72的表达，因此认为HS
P72似与耐受无关。Garnier等[17]也发现，沙土鼠低氧预处理后海马未见HSP72表
达。星形细胞则参与细胞间液中K+代谢的调节和利用，维持神经元生存微环境的稳
定，分泌神经营养因子，如神经生长因子，从而参与了预适应保护机制。Garnier
等[17]用免疫组化和免疫印迹法检测胶质纤维酸性蛋白，并用免疫组化检测isole
ctin B4的表达，结果表明沙土鼠低氧处理与小胶质细胞激活无关，而星形细胞却
明显被激活。?

3 脑低氧预适应的应用前景?

虽然脑低氧预适应的机制尚不十分清楚，但是预适应的效应提示脑组织具有自身保
护机制。如能对脑低氧预适应过程中产生的某些物质进行分离、纯化，试用于卒中
和其他缺血缺氧性疾病的治疗中，也许将提高脑神经元等组织对缺血缺氧的耐受性
，延长治疗时间窗，减轻后遗症，并为脑损伤等疾病的防治提供新的选择。 

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